用于胞内靶点确证的抗体片段

【新闻事件】：今天《自然化学生物学》发表一篇几个大学合作发现的一个靶点确证技术。作者用一个叫做WDR5的蛋白作为这个技术的概念验证，首先用噬菌体和酵母展示技术找到22个所谓的monobody。活性最高的（简称MbS4）在细胞内表达后显示可以抑制MLL甲基转移酶活性、降低MLL驱动白血病细胞增殖速度、并在动物模型中显示抑制白血病肿瘤增长，从而在临床前全面验证WDR5在MLL驱动白血病治疗中的相关性。

【药源解析】：MLL是一个叫做H3K4甲基转移酶的表观遗传靶点，催化组蛋白的甲基化、进而开始一些诱癌基因的表达。MLL主要在部分急性白血病中有驱动作用。MLL本身活性很低，但与WDR5和其它几个蛋白结合形成复合物后活性大增，所以阻断WDR5与MLL的结合一直是个治疗策略。但这种蛋白蛋白相互作用很难用小分子药物调控，现在最好的化合物也只有5%的过膜性、而且药代性质很差，所以只在细胞水平显示抑制肿瘤增长。今天这个工作第一次在动物模型中显示阻断MLL/WDR5相互作用可以抑制肿瘤生长。

靶点确证依然是现在新药发现的一个核心任务。这个工作大概可以分成两部分，即临床前和临床确证。临床前靶点确证是用动物模型验证干扰一个蛋白可能有治疗效果，但这个疗效在临床试验中未必能重复。临床验证一般指在二期临床看到机理相关的疗效信号，这对全新机理来说是个非常重要的事件。多数在临床前验证过的机理在人体二期临床没有疗效，这是新药失败的一个主要原因。但这不等于临床前靶点验证很容易，事实上现在临床前靶点确证还是一个重要技术障碍。

现在常用的技术是用基因技术如基因敲除，最近CRISPR敲除筛选也非常流行。但基因水平敲除会把整个蛋白清除，可是你将来的药物一般只是抑制这个蛋白的部分功能，最经常是其催化功能。而很多蛋白还有催化功能以外的功能如与其它蛋白形成复合物，如果是这些功能与疾病有关即使基因敲出显示疗效抑制催化功能的药物也不一定有效。小分子药物（对于胞内靶点）是更相关的靶点确证办法，但找到高活性、高选择性、高过膜性的工具化合物通常需要大量时间和投入。如WDR5是个相对古老的靶点，但现在也没找到可以用于体内验证的小分子抑制剂。

所以monobody是个验证胞内靶点的有用技术。这可能令很多看上去很诱人、但一直没有小分子药物的非成药靶点如Kras能够得到验证。如果monobody显示这些所谓高价值靶点只是因为小分子工具化合物难找而装神弄鬼，就根本没必要在这些wizard of Oz上耽误工夫了。当然如果Kras得到验证制药界就更纠结了，因为monobody只帮助确证靶点、本身不能作为药物（需要在胞内表达）。现在有几个与这个思路相似的小分子技术，如Warp Drive Bio的SMART技术可以利用小分子与胞内蛋白结合后形成的复合物去抑制非成药靶点功能。Cellidia的蛋白降解平台也可以用小分子干扰非成药蛋白复合物的稳定性而诱导其降解。但这些技术还在早期，到底适用性多广泛还有待观察。制药业现在最需要能把monobody大小的分子递送到细胞内的高新技术。

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